Sığır viral ishal virüsü antikoru elisa kiti

Spesifikasyon

 

Test Prosedürleri ve Yorumlama

 

Adım 1 Test Prosedürü

1.1 Yıkama Çözüm Hazırlığı

Working konsantrasyonu wAshing sıvısı:Kullanmadan önce, yıkama çözeltisi oda sıcaklığına (20-25}} derece) geri yüklenmeli ve düzgün hale getirmek için eşit olarak çalkalanmalıdır. Daha sonra konsantre yıkama çözeltisinin saflaştırılmış su ile 20 katını seyreltin (örneğin, 95ml saflaştırılmış suya 5 ml konsantre yıkama çözeltisi ilave edilir), iyice karıştırın ve seyreltilmiş yıkama sıvısı 7 gün boyunca 2-8 derecesinde saklanabilir.

1.2 Örnek hazırlama

① Bütün hayvan kanı alındı, 10 dakika boyunca 4000rpm'de santrifüjlendi ve süpernatan toplandı. Serum ayrıca hemoliz olmadan doğal olarak pıhtılaşabilir.

Serum Serum örneğini 1:50 (147ul numune seyreltici için 3ul serum örneği ekleyin) seyreltin ve iyice karıştırın.

Not: Negatif ve pozitif kontrollerin de seyreltilmesi gerekir.

1.3 enzim konjugat hazırlığı

Enzim konjugatı 1: 250 (2ul enzim konjugatı (x100) 498ul numune seyreltici ekleyin) seyreltin ve iyice karıştırın.

1.4 Test prosedürü

Enzim Etiket Mikroplaka (numune sayısına göre, sökülebilir ve birkaç kez kullanılabilir), enzim etiketi mikroplaka 100ul seyreltilmiş serum ekleyin, negatif ve pozitif numuneler için her biri iki kuyu ekleyin ve her biri 100ul ekleyin. ve sırasıyla reaksiyonun pozitif kontrolleri. Plakayı örtmek için sızdırmazlık plakası filmini kullanarak numuneyi kuyuda hafifçe sallayın ve 30 dakika boyunca 37 derecede inkübe edin.

Sızdırmazlık plakası filmini açın, plakadaki çözeltiyi sallayın, her kuyuya 300 ufun çalışma konsantrasyonu yıkama sıvısı ekleyin ve sonra sıvıyı kuyuda atın. Yukarıdaki adımları 5 kez tekrarlayın ve son olarak temiz bir emici kağıt üzerinde kurutun.

Her bir oyuk için 100µl enzim konjugatını yaptırın, plakayı örtün ve 45 dakika boyunca 37 derecede inkübe edin.

Sızdırmazlık plakası filmini açın, plakadaki çözeltiyi sallayın, her kuyuya 300 ufun çalışma konsantrasyonu yıkama sıvısı ekleyin ve sonra sıvıyı kuyuda atın. Yukarıdaki adımları 5 kez tekrarlayın ve son olarak temiz bir emici kağıt üzerinde kurutun.

Her bir oyuk için 100 ul substrat çözeltisi, plakayı örtün ve ışıktan 37 derece uzakta 10 dakika inkübe edin.

Her oyuk için 50 ul durdurma çözeltisi ve sonucu 5 dakika içinde belirleyin.

 

Adım 2 Sonuç Yorumu

 

Her oyukun OD450 değeri 96- kuyu mikroplaka okuyucu üzerinde okundu.

2.1 Doğrulama

Negatif kontrolün ortalama OD450Nm değeri<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Hesaplama yöntemi

Her numune için, düzeltilmiş numune ve kontrol değerlerini kullanarak S/P'yi aşağıdaki gibi hesaplayın:

2.3 Sonuç Yorumu

S/P ne zaman<0.25, it is judged as negative.

S/P 0. 35'e eşit veya eşit olduğunda, pozitif olarak değerlendirilir.

0. 25 S/P'den daha az veya eşit olduğunda<0.35, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

 

Popüler Etiketler: sığır viral ishal virüsü antikor elisa kit, Çin sığır viral ishal virüsü antikor elisa kiti tedarikçileri, üreticiler, fabrika