Kullanım Amacı: BulaşıcıSığır Rinotrakeitis VirüsüAntikor ELISA Tespit Kiti aşağıdaki amaçlar için kullanılır:bulaşıcı rinotrakeitin belirlenmesiİn vitro sığır serumunda virüs antikorları.
Numune: serum
Sağlanan Malzemeler:
Test Prosedürleri ve Yorumlanması
ADIM 1 Test Prosedürü
1.1 Yıkama Solüsyonunun Hazırlanması
Wçalışma konsantrasyonu wkül sıvısı:Kullanmadan önce yıkama solüsyonu oda sıcaklığına (20-25 derece) getirilmeli ve homojen hale getirmek için eşit şekilde çalkalanmalıdır. Daha sonra konsantre yıkama solüsyonunu arıtılmış suyla 20 kat seyreltin (örneğin 95ml saf suya 5ml konsantre yıkama solüsyonu eklenir), iyice karıştırın ve seyreltilmiş yıkama sıvısı 7 gün boyunca 2-8 derecede saklanabilir.
1.2 Numune Hazırlama
① Tam hayvan kanı alındı, 4000 rpm'de 10 dakika santrifüj edildi ve süpernatan toplandı. Serum ayrıca hemoliz olmadan doğal olarak pıhtılaşabilir.
② Test edilecek serumu, serum seyreltme plakasında 50 kez seyreltin (örneğin: test edilecek serumdan 3 ul'yi 147 ul numune seyrelticisine ekleyin).
Not: Negatif ve pozitif kontrollerin seyreltilmesine gerek yoktur
1.3 Test Prosedürü
①Enzim etiketli Mikroplakayı alın (numune sayısına göre parçalara ayrılabilir ve birkaç kez kullanılabilir), enzim etiketli Mikroplakayıya 100ul seyreltilmiş serum ekleyin, negatif kontrol ve pozitif kontrol için her biri iki kuyucuk ayarlayın ve reaksiyon kuyucuğuna sırasıyla 100ul ekleyin. Plakayı kaplamak için sızdırmazlık plakası filmini kullanarak numuneyi kuyucukta yavaşça sallayın ve 30 dakika boyunca 37 derecede inkübe edin.
②Sızdırmazlık plakası filmini açın, plakadaki solüsyonu iyice çalkalayın, her bir kuyucuğa 300 µl çalışma konsantrasyonu yıkama sıvısı ekleyin ve ardından kuyucuktaki sıvıyı atın. Yukarıdaki adımları 5 kez tekrarlayın ve son olarak temiz, emici bir kağıt üzerinde kurulayın.
③Seyreltilmiş enzim konjugatı:Enzim konjugatını (80x) 80 kez seyreltin (örneğin: 10ul enzim konjugat konsantresi + 790ul numune seyreltici, gereken spesifik miktar, test örneklerinin sayısına göre hesaplanır), iyice karıştırın ve bir kenara koyun.
④Her kuyucuğa 100 µl Enzim Konjugatı ekleyin, plakayı kapatın ve 30 dakika boyunca 37 derecede inkübe edin.
⑤Enzim plakasının yıkanması, özel işlem yukarıdaki ② ile aynıdır.
⑥Her kuyucuğa 100μl substrat solüsyonu ekleyin, plakayı kapatın ve ışıktan uzakta 37 derecede 10 dakika inkübe edin.
ADIM 2 Sonuçların Yorumlanması
Her kuyucuğun OD450 değeri 96 kuyucuklu mikroplaka okuyucuda okundu.
2.1 Doğrulama Negatif kontrolün ortalama OD450nm değeri < 0,25 ve pozitif kontrolün ortalama OD450nm değeri 0,6'dan büyük veya eşitti, deneysel sonuçlar geçerliydi. Aksi takdirde testin tekrarlanması gerekir.
2.2 Hesaplama Yöntemi
Her numune için düzeltilmiş numune ve kontrol değerlerini kullanarak S/P'yi aşağıdaki şekilde hesaplayın:
2.3 Sonuçların Yorumlanması
S/P < 0,2 olduğunda negatif olarak değerlendirilir.
S/P > 0,3 olduğunda pozitif olarak değerlendirilir.
0,2 S/P'den küçük veya ona eşit 0,3'ten küçük veya eşit olduğunda şüpheli olarak değerlendirilir ve numune alma işleminin tekrarlanması ve bir hafta sonra test yapılması önerilir.
Popüler Etiketler: bulaşıcı sığır rinotracheitis virüsü antikoru elisa tespit kiti, Çin bulaşıcı sığır rinotracheitis virüsü antikoru elisa tespit kiti tedarikçileri, üreticiler, fabrika
